脂立方相

蛋白结晶

自动化脂立方相工作流程

脂立方相(LCP)是膜蛋白结晶的优异介质,在全球顶尖的制药实验室中日益普及。Formulatrix 提供完整的产品套件,用于自动化 LCP 工作流程的每个阶段:点样、筛选结晶条件、以及蛋白质晶体成像与鉴定。

通过 Rock Maker 这一款软件,即可管理从设计、点样到图像查看与分析的全部蛋白质结晶实验过程。

Rock Maker 是一个实验室信息管理系统(LIMS),在整个流程的每一步为您提供支持,其功能强大且易于使用的工具,可帮助您快速获得所需结果。

 

Rock Maker 可与以下系统集成:

NT8® - 纳升级蛋白结晶移液工作站

Formulator® - 结晶优化移液工作站

Rock Imager® - 蛋白结晶成像系统

SONICC® - 蛋白质晶体检测系统

FRAP® - LCP 条件预筛选系统

可靠的点液:降低成本 + 提高重现性

  • 可点样悬滴、坐滴、微批量、脂立方相(LCP)液滴、添加剂以兼容悬滴、坐滴、油滴、 LCP 脂立方、添加剂和种晶实验。
  • 8通道点样头能吸取并分配从 10 nL 至 1.5 μL 范围的液滴。
  • 点样头可以重复使用,用户可以选择在每次液滴分配后将点样头扔掉或重复使用以降低成本和减少环境废物。
  • 线性等比控制的主动加湿可防止样品蒸发并提高实验重现性
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无需等待晶体生长,即可找到 LCP 晶体生长的最优条件。

在建立结晶实验之前,您可以使用荧光漂白后恢复(FRAP)技术快速筛选脂立方相(LCP)条件。FRAP 是一种光学技术,用于评估蛋白质在 LCP 液滴中移动的难易程度。如果蛋白质发生聚集或 LCP 结构塌陷,蛋白质将无法扩散,因而永远无法结晶。FRAP 是一个极佳的工具,可加速结晶方法开发,并在无需等待晶体实际生长的情况下排除非最佳条件。

自动化 FRAP 成像系统专为对 96 孔 LCP 结晶实验板进行 FRAP 分析而设计。整个系统自动运行且用户友好,只需点击几下按钮即可启动对整板的完整分析。所有结果和分析均集成到 Formulatrix 的蛋白质晶体学专用实验管理软件(Rock Maker Rock Imager)中。

FRAP 技术是与 Vadim Cherezov (TSRI) 以及由 Ray Stevens 领导、NIH 结构生物学共同基金支持的 JCIMPT 中心合作开发的。

结晶成像清晰,速度无与伦比。

蛋白质结晶领域最受信赖的成像仪——全球前十强制药公司和众多知名学术中心都在使用

 

支持多种成像方法筛选条件——可见光、紫外荧光、紫外吸收、多重荧光成像、荧光漂白后恢复(FRAP)和手性晶体二阶非线性成像(SONICC)

 

多种型号适应您的预算和工作流程——结晶板容量从单板到最多 970 块 SBS 板或 1500 块 LCP 板

 

与 ROCK MAKER无缝集成或通过 Rock Imager API 与您当前的结晶软件无缝集成

 

提供温度调节选项,可实现从 30°C 到 4°C 的精确温控

 

支持多种板型——SBS、Linbro、Nextal、Terasaki/HLA 和脂立方相(LCP)板。

消除猜测。

SONICC 能发现其他技术无法发现的晶体。

作为蛋白质晶体可视化领域的终极成像技术,手性晶体二阶非线性成像(SONICC)能明确地发现掩埋在沉淀物中或被肉眼忽略的亚微米晶体。它将两种强大技术——二次谐波产生(SHG)和紫外双光子激发荧光(UV-TPEF)——结合于一台全自动成像仪中,快速对您的高通量结晶板进行成像并明确鉴定蛋白质晶体。

晶体在纯黑色背景下呈现为白色,帮助您即使在浑浊环境中也能识别晶体。SONICC 能够检测极薄的晶体、小于 1 μm 的微晶以及被双折射性 LCP 掩盖的晶体。

全球主要的制药和学术研究实验室都发现 SONICC 技术极其成功、成本效益高且高效。

FAQs

脂立方相(LCP)结晶基本原理

什么是脂立方相蛋白结晶?其工作原理是什么?
脂立方相(LCP)蛋白结晶是一种旨在生长高质量膜蛋白晶体的强大技术。其工作原理是将特定脂质(最常用的是单油酸甘油酯)与蛋白质水溶液混合,形成一种高度有序、双连续的脂质双层结构,即立方相。该结构高度模拟了膜蛋白的天然环境,有助于它们维持天然构象和稳定性。在这种脂质基质中,蛋白质能够缓慢扩散,从而在接近生理条件下实现有序的晶体生长。因此,LCP为获得衍射良好的膜蛋白晶体提供了一个理想平台,而这些膜蛋白采用传统水相方法结晶通常极具挑战性。

为何脂立方相方法被广泛用于膜蛋白结晶?
脂立方相(LCP)方法被广泛用于膜蛋白结晶,是因为它能提供一种近乎天然的环境,高度模拟细胞膜天然的脂质双层。这种环境有助于膜蛋白维持其天然构象、结构完整性和生物活性。此外,LCP允许蛋白质在脂质双层内完全保持流动性,从而促进形成有序的晶体,适用于高分辨率结构研究。

LCP蛋白结晶有哪些常见挑战与局限性?
在脂立方相(LCP)中结晶膜蛋白存在几个实际挑战。立方相本身具有高粘度——类似于厚重的牙膏——使其难以精确处理和分装。早期的方法需要在小型玻璃管中进行多次离心,使得混合和晶体收获过程繁琐、低效,且容易造成样品损失。目前虽已使用专用工具(如耦合注射器混合器)来混合微升级别的脂质和蛋白质溶液,但仍需要技术技巧和小心操作以尽量减少浪费。若没有高质量光学设备或交叉偏振光,检测通常只有几微米大小的微晶也很具挑战性。此外,LCP结晶实验可能需要数月才能完成,在整个孵育期间需要长期稳定且一致的环境条件。

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