聚合酶链反应(PCR)彻底改变了生物学研究,尤其在基因工程和诊断学领域。由于其高度的适应性,PCR 可被定制以满足广泛的应用需求,其中最显著的是核酸序列的定量检测——包括相对定量(定量 PCR 或 qPCR)和绝对定量(数字 PCR 或 dPCR)。
PCR 的核心过程分为两个关键步骤:液体处理和热循环。液体处理步骤包括转移样品,并将关键反应组分(如缓冲液、酶、引物、探针和 dNTPs)精确分装到 PCR 板的各个孔中。这一初始步骤为后续的热循环过程奠定了基础,在热循环中,温度变化实现了核酸的扩增。
PCR工作流程中的液体处理步骤
在 PCR 工作流程中手动移取低体积组分,会因操作者差异而引入不一致性,尤其是在需要高精度的 PCR 方案设置中。此外,高通量实验需要微型化的反应体系,而手动移液器在亚微升级体积下的不精确性更为明显。同时,手动处理大批量样本耗时费力,降低了工作流程效率,并增加了交叉污染的风险。尽管手动移液看似成本低廉,但其效率低下、潜在的误差风险、低体积操作限制以及相关的试剂浪费,反而增加了不必要的成本。为了克服这些挑战,自动化液体处理为获得可重复的结果提供了更可靠的解决方案。
Formulatrix 自动化液体处理用于 PCR 方案设置
Formulatrix 的自动化液体处理系统通过结合精确性、反应体系微型化和高通量,重新定义了 PCR 方案的设置。
- 精确性: 可精确转移低至 100 nL 的体积,且CV <2%,确保结果的一致性和可靠性。
- 反应微型化: 死体积可低至 6 µL,最大限度地减少浪费,非常适合微型化 PCR 反应并节省宝贵的样品。
- 高通量: 兼容标准和定制板型,包括 384 孔板和 1536 孔板,以满足不同的应用需求。
- 高效集成: CSV 文件兼容性和 API 集成等功能简化了工作流程,实现了无缝的高通量处理。
| PCR工作流程液体处理功能 |
Formulatrix ALH Mantis Tempest F.A.S.T. FLO i8 PD |
|---|---|
| PCR组分转移 | ✔    ✔    ✔    ✔ |
| 样品转移 | ✔    ✔    ✔    ✔ |
| 缓冲液转移 | ✔    ✔    ✔    ✔ |
| 浓度标准化 | ✔    ✔    ✔    ✔ |
| 连续稀释 |       ✔    ✔ |
| 样品合并 |       ✔    ✔ |
| 微孔板标记 |       ✔    ✔ |
| 微孔板重排 |       ✔    ✔ |
| 磁珠转移 | ✔    ✔    ✔    ✔ |
Formulatrix ALH 系统在 PCR 工作流程中的主要功能
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